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CellDrop™自動細胞計數儀具有大量集成應用程序設置,為生物化學和生命科學設施中的高可靠性分析測試提供了創新的解決方案。這些儀器可自動執行細胞計數過程,并在幾秒鐘內提供準確的活力評估。借助雙熒光和明場光學元件,它們可以通過加速初始計數和消除手動過程可能存在的誤差幅...
質量和來源:選擇高質量的胎牛血清供應商,并確保其符合國際標準和質量控制要求。了解胎牛血清的來源和處理方式,以確保其質量和純度。批次一致性:由于不同批次的胎牛血清存在差異,建議在實驗中盡量使用同一批次的血清,以減少結果的變異性。儲存和解凍:通常情況下,胎牛血清應-20°C以下冷凍保存。并避免多次凍融循環,因為這可能會降低其效力。解凍時,將冷凍血清先置于4°C冰箱中融解,然后再移入室溫。在解凍過程中可均勻搖晃,使溫度與成份均一,減少沉淀的發生。滅活處理:56°C加熱可滅活補體系統...
血清更換注意事項及步驟一、推薦在復蘇時步驟:1.首先準備一只15ml離心管,加入3倍以上體積培養基(含10%澳范血清,1%青鏈霉素的適配培養基,具體培養基類型查詢ATCC)。2.將需要復蘇的凍存管放于37℃水浴鍋中(液面沒過凍存液),并持續輕柔晃動凍存管,直至冰晶消失。2.迅速轉移細胞至無菌操作臺,酒精棉球擦拭干凈凍存管表面后開蓋。3.輕柔地將細胞轉移至已經準備好的無菌離心管,800-1000g離心5min(不同離心機離心力不同,請選擇合適離心力),棄去上清,用上述培養基重懸...
常見細胞污染細胞污染——培養物出現渾濁、混濁。培養液pH值升高,液黃。細胞異常的形態,如胞質內細菌吞噬體。細胞的生長速率減緩,對數生長期變得不規律。異常的細胞死亡或細胞溶解情況。真菌污染——培養液可能出現異味。培養皿內有異常的顏色、紋理或斑點。細胞顯示出不正常的細胞形態,如真菌吞噬體或真菌絲狀體。細胞的生長速率可能受到抑制,細胞數量不斷減少。支原體污染——支原體污染通常不會導致明顯的細胞培養液變化。因此,支原體污染通常需要PCR或DNA雜交來檢測。可能出現感染跡象,如出現包涵...
傳代方法概述1.消化傳代:棄去培養基,PBS潤洗一次后加入適量胰酶晃勻(以蓋住細胞表面為宜),放入培養箱消化。細胞呈斑片狀時加入等體積新鮮全培養基終止消化。吹打細胞后轉移懸液至潔凈離心管,600g離心5分鐘。棄去上清,用新鮮培養基重懸細胞至培養瓶,補足培養液體積,移入培養箱培養。2.直接傳代:用吸管吸取細胞懸液的1/2~1/4至另一瓶中;加入適量的新鮮培養基,補足培養液體積,培養箱繼續培養。3.離心傳代:將細胞懸液轉移至離心管內,600g離心5min,棄去上清。使用新鮮的培養...
細胞基本操作●細胞復蘇●細胞密度判斷及換液●為什么需要細胞傳代●細胞凍存注意事項●常見細胞污染及處理細胞復蘇準備工作——操作臺消毒潔凈,預熱培養基,準備培養瓶及離心管解凍細胞及離心——從液氮/-80冰箱取出細胞,迅速轉移到37°C水浴鍋中,浸沒深度應超過凍存物,并持續搖晃直至無凍塊。酒精棉球擦拭凍存管后移入操作臺。向凍存管中加入1ml預熱培養基,輕輕吹打,轉移所有液體至離心管。常溫800g離心5分鐘接種及培養——棄去上清,使用預熱的培養基重懸細胞至培養瓶,立即放入培養箱。
選擇適當的細胞培養基是細胞培養中非常重要的步驟,它會影響細胞的生長速率、狀態和實驗結果。1.首先參考文獻和廠家建議:查閱ATCC(AmericanTypeCultureCollection)或相關文獻,了解以前研究同一或相似細胞系的人所使用的培養基和條件。細胞及細胞培養物廠商提供的說明都是有用的參考資料。2.根據細胞類型和實驗需求:常規來說,培養基均需要添加10-15%血清(一般為胎牛血清)以提供蛋白,部分生長因子,維生素及其他輔助物質。以促進細胞生長、維持表型。非無菌室的細...
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